PCR/qPCR耗(hao)材選(xuan)擇的(de)幾個(ge)主(zhu)要因素(su)!

　　1.塑料(liao)耗(hao)材(cai)組成(cheng)：

　　材(cai)料

　　PCR/qPCR耗材通(tong)常由(you)聚(ju)丙(bing)烯(xi)制(zhi)成(cheng)，因為(wei)它是(shi)惰性的(de)並(bing)且能(neng)夠(gou)承受熱循(xun)環過程(cheng)中溫(wen)度的(de)快速(su)變化(hua)。 聚(ju)丙(bing)烯(xi)的(de)惰性性質(zhi)使(shi)其對於反(fan)應(ying)物(wu)質(zhi)的(de)吸收(shou)降低至(zhi)最小(xiao)，確保(bao)獲(huo)取最(zui)佳的(de)PCR結(jie)果(guo)。為(wei)了進壹(yi)步保(bao)障(zhang)在純(chun)度和(he)生(sheng)物(wu)兼(jian)容性方面(mian)的(de)批次(ci)間(jian)壹致(zhi)性，應(ying)當(dang)在生(sheng)產(chan)過(guo)程中使(shi)用全(quan)新(xin)未循(xun)環使(shi)用的(de)醫學級(ji)或(huo)分(fen)子(zi)生(sheng)物(wu)學級(ji)高(gao)品(pin)質(zhi)聚(ju)丙(bing)烯(xi)原料(liao)。請註意(yi)，某些(xie)PCR / qPCR板(ban)邊(bian)框用更強的(de)聚(ju)碳酸酯制(zhi)成(cheng)，以與(yu)高(gao)通(tong)量(liang)機器人應(ying)用兼(jian)容。

　　顏(yan)色(se)

　　PCR管(guan)和(he)板(ban)通(tong)常可提(ti)供(gong)多種不同的(de)顏色(se)形(xing)式，以便於對於樣品(pin)的(de)視覺(jiao)區分(fen)和(he)鑒別，特(te)別(bie)是(shi)在高(gao)通(tong)量(liang)實(shi)驗中。盡管(guan)塑(su)料(liao)的(de)顏色(se)對DNA擴(kuo)增沒有(you)影(ying)響，但在設(she)置實(shi)時PCR或(huo)qPCR的(de)反(fan)應(ying)時(shi)，與(yu)透(tou)明耗(hao)材(cai)相比(bi)，我(wo)們更推薦使(shi)用白(bai)色(se)塑(su)料或(huo)磨(mo)砂耗(hao)材，以實(shi)現(xian)靈(ling)敏和(he)準(zhun)確的(de)熒光(guang)檢(jian)測(ce)(圖43)。

　　白(bai)色(se)耗(hao)材通(tong)過(guo)阻止(zhi)熒光(guang)折射(she)出(chu)管(guan)來(lai)提(ti)高(gao)qPCR數據的(de)靈(ling)敏度和(he)壹(yi)致(zhi)性。折射(she)被(bei)最(zui)小化(hua)時(shi)，更多的(de)信號(hao)被(bei)反(fan)射(she)回檢(jian)測(ce)器，從而(er)增加(jia)信噪(zao)比(bi)。此(ci)外，白(bai)色(se)管(guan)壁可阻止(zhi)熒光(guang)信號(hao)傳(chuan)遞(di)至(zhi)PCR儀模(mo)塊，避免被吸(xi)收(shou)或(huo)不(bu)壹(yi)致(zhi)地反(fan)射(she)熒(ying)光(guang)信號(hao)，從(cong)而使(shi)重(zhong)復(fu)實(shi)驗中的(de)差異降(jiang)至(zhi)。由(you)於每個(ge)品(pin)牌(pai)儀器的(de)設(she)計不(bu)同，請遵循(xun)廠(chang)家建議以獲(huo)得最(zui)佳性能(neng)。比(bi)如(ru)，對於Bio-Rad和Roche品(pin)牌(pai)的(de)定量儀器，推薦使(shi)用白(bai)色(se)耗(hao)材用於qPCR。而對於Applied Biosystems熒光(guang)定(ding)量PCR儀，推薦使(shi)用磨(mo)砂孔耗材(cai)。

　　PCR/qPCR塑料(liao)耗(hao)材(cai)要點：

　　PCR/qPCR塑料(liao)耗(hao)材可提(ti)供(gong)多種規格和形(xing)式。了解他們相(xiang)應(ying)的(de)特(te)點(dian)和相關術語(yu)將(jiang)會幫(bang)助您在使(shi)用這(zhe)些(xie)塑(su)料(liao)耗(hao)材(cai)時獲(huo)得最(zui)佳的(de)PCR和qPCR結(jie)果(guo)。

　　壹般(ban)屬性

　　反(fan)應(ying)規模或(huo)加(jia)樣(yang)體(ti)積(ji)

　　PCR/qPCR塑料耗材(cai)的(de)加(jia)樣(yang)體(ti)積(ji)決(jue)定了可成(cheng)功進(jin)行的(de)PCR/qPCR反(fan)應(ying)的(de)規模(體(ti)積(ji))。過量的(de)加(jia)樣(yang)將(jiang)會導(dao)致熱傳導(dao)的(de)效(xiao)率下降，溢出(chu)以及(ji)交叉(cha)汙染。另壹方面(mian)，加(jia)樣(yang)不(bu)足(zu)則會導(dao)致樣(yang)品因蒸(zheng)發而(er)損耗(hao)。加(jia)熱模塊也(ye)決(jue)定了可使(shi)用的(de)塑料耗(hao)材尺寸(cun)以及(ji)它們對於完整(zheng)而有(you)效(xiao)熱傳導(dao)的(de)最佳適(shi)配(pei)性。PCR/qPCR耗(hao)材(cai)的(de)最常見體積(ji)規格為(wei)：

　　管(guan)：0.5 mL, 0.2 mL, 0.1 mL

　　96 孔板：0.2 mL, 0.1 mL

　　384 孔板：0.02 mL

　　裙(qun)邊(bian)：

　　PCR / qPCR板的(de)“裙"是(shi)板周(zhou)圍(wei)的(de)板。裙邊(bian)可為(wei)反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)構(gou)建時的(de)移液過程提(ti)供較(jiao)好的(de)穩定(ding)性，以及(ji)在進(jin)行自動機械處(chu)理(li)時提(ti)供(gong)更好的(de)機械強(qiang)度。PCR / qPCR平板可分(fen)為(wei)無(wu)裙(qun)邊(bian)，半裙(qun)邊(bian)和全裙(qun)邊(bian)。

　　無(wu)裙(qun)邊(bian)板缺(que)少周(zhou)圍(wei)的(de)面(mian)板(ban)。這(zhe)種形(xing)式的(de)反(fan)應(ying)板(ban)可與(yu)絕大(da)多(duo)數PCR儀和(he)實(shi)時PCR儀的(de)模塊適(shi)配(pei)，但(dan)不(bu)適(shi)用於自動(dong)化應(ying)用。

　　半裙(qun)邊(bian)板在板(ban)的(de)邊(bian)緣周(zhou)圍(wei)具(ju)有(you)短的(de)邊(bian)緣,在移液過程中提供足(zu)夠(gou)的(de)支(zhi)撐並(bing)且為(wei)機器人處(chu)理(li)提供(gong)機械強(qiang)度。

　　全(quan)裙(qun)邊(bian)的(de) PCR / qPCR板具(ju)有(you)覆蓋(gai)板(ban)高(gao)度的(de)邊(bian)緣面(mian)板(ban).這(zhe)種板(ban)形(xing)式適(shi)用於具(ju)有(you)突出(chu)模塊的(de)PCR儀(可有(you)利於自動(dong)化操(cao)作(zuo))，可安(an)全(quan)穩固(gu)適(shi)配(pei)。