熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR耗(hao)材(cai)的(de)使用和選擇(ze)註意(yi)事(shi)項

　　PCR板

　　PCR板(ban)是壹(yi)種在聚合酶鏈(lian)式(shi)反(fan)應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)中(zhong)主(zhu)要(yao)作(zuo)為(wei)參與(yu)擴增(zeng)反(fan)應的(de)引(yin)物、Taq DNA聚合酶、dNTP、模(mo)板(ban)核酸、Mg、緩(huan)沖(chong)液等的(de)承(cheng)載物(wu)。

　　PCR板(ban)材(cai)質(zhi)

　　其本身(shen)材(cai)質(zhi)在當今(jin)主(zhu)要(yao)以聚丙烯(xi)(PP)為(wei)主(zhu)，能(neng)更好(hao)適應PCR反(fan)應過程(cheng)中(zhong)反(fan)復(fu)高低(di)溫設(she)定(ding)，並(bing)且能夠(gou)實(shi)現(xian)高溫高壓(ya)滅(mie)菌(jun)操作。為(wei)配合排槍(qiang)、PCR儀(yi)等(deng)實現(xian)高通量(liang)操作，較常(chang)使用的(de)為(wei)96孔或384孔的(de)PCR板(ban)。板(ban)型符(fu)合SBS國際(ji)標(biao)準(zhun)，且(qie)為(wei)適應不(bu)同廠家的(de)PCR儀(yi)，根據裙(qun)邊設(she)計(ji)又(you)可(ke)分(fen)為(wei)無裙(qun)邊(bian)、半裙(qun)邊、升裙邊(bian)和全裙(qun)邊(bian)四(si)種設計模式(shi)。

　　PCR板(ban)常(chang)見(jian)顏(yan)色

　　有(you)透(tou)明(ming)和(he)白(bai)色，其中(zhong)白(bai)色更適合用於(yu)新型的(de)實(shi)時(shi)熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR。

　　PCR板用途(tu)

　　廣(guang)泛應用於(yu)遺傳(chuan)、生(sheng)化(hua)、免疫(yi)、醫(yi)藥(yao)等領(ling)域，不(bu)僅應用於(yu)基(ji)因(yin)分離、克隆(long)和(he)核酸序列(lie)分析等(deng)基礎(chu)研究(jiu)，還可(ke)用於(yu)疾(ji)病(bing)的(de)診斷(duan)或(huo)任(ren)何有(you)DNA，RNA的(de)地(di)方，屬(shu)於(yu)實(shi)驗(yan)室壹(yi)次(ci)性(xing)易(yi)耗(hao)品。

　　如何正(zheng)確使用96孔PCR孔板

　　PCR板有(you)透(tou)明(ming)和(he)乳(ru)白(bai)色可選(xuan)，其中(zhong)乳白(bai)色更適合用於(yu)頂(ding)部采(cai)集熒光(guang)信(xin)號(hao)的(de)新型熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR儀(yi)(如(ru)伯(bo)樂(le)CFX系(xi)列(lie)，ABI 7500fast 以上型號(hao)， Roche 480系(xi)列(lie))，但(dan)如(ru)果(guo)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)是(shi)底部光(guang)源的(de)，則(ze)應選(xuan)擇透(tou)明(ming)的(de)。

　　PCR板(ban)根據裙(qun)邊設(she)計(ji)又(you)可(ke)分(fen)為(wei)無裙(qun)邊(bian)、半裙(qun)邊和(he)全裙(qun)邊(bian)三(san)種設計模式(shi)，不(bu)同廠家的(de)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)會(hui)設計(ji)不(bu)同的(de)切(qie)角或(huo)邊(bian)緣凸(tu)起，請(qing)選(xuan)擇(ze)適合該(gai)PCR儀(yi)的(de)板(ban)子(zi)。

　　PCR板(ban)又(you)分(fen)100ul體(ti)積(矮板)和(he)200ul體(ti)積(高板)，根據機(ji)型的(de)不(bu)同選擇，選(xuan)擇(ze)不(bu)同高度(du)孔板，避免高度(du)錯誤(wu)對機器(qi)造(zao)成(cheng)破壞和加熱(re)不(bu)均(jun)導致(zhi)數(shu)據(ju)失(shi)真。

　　當使用96孔板做熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR實驗(yan)的(de)時(shi)候(hou)，推薦(jian)使用光學膜代來密(mi)封(feng)反(fan)應孔。正(zheng)確的(de)封(feng)膜方法(fa)是(shi)：先沿(yan)著96孔板的(de)縱(zong)向(xiang)壓(ya)膜，然後橫(heng)向(xiang)，最後沿(yan)著板的(de)邊(bian)緣(yuan)按(an)壓(ya)使之密封(feng)。具體(ti)手法(fa)見(jian)下(xia)面(mian)圖(tu)示：

　　加樣(yang)後會(hui)在(zai)管壁上飛(fei)濺(jian)壹(yi)些(xie)小(xiao)液滴(di)，另(ling)外(wai)反(fan)應體(ti)系(xi)內(nei)也(ye)會(hui)有(you)壹(yi)些(xie)氣泡，需(xu)要(yao)離心去(qu)掉(diao)掛(gua)壁液滴(di)和氣(qi)泡(pao)。請(qing)使用專用的(de)微(wei)孔板離心機(ji)解(jie)決(jue)上(shang)述(shu)問題。

　　PCR板屬(shu)於(yu)壹(yi)次(ci)性(xing)消(xiao)耗(hao)品，生產壹(yi)次(ci)成(cheng)型，不(bu)建議剪開使用容易(yi)造(zao)成(cheng)實(shi)驗(yan)誤(wu)差增加，不(bu)能清洗或(huo)部分(fen)重復(fu)利(li)用。不(bu)要(yao)為(wei)了節省(sheng)壹(yi)點(dian)小(xiao)錢(qian)，而給(gei)實(shi)驗(yan)帶(dai)來後續(xu)分(fen)析上(shang)的(de)困擾。

　　熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR耗(hao)材(cai)的(de)使用和選擇(ze)註意(yi)事(shi)項，先和(he)大家(jia)介(jie)紹到這(zhe)，如(ru)果(guo)想(xiang)要(yao)了解更多熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR耗(hao)材(cai)的(de)信(xin)息，可以關(guan)註天(tian)津本生生(sheng)物，專(zhuan)業(ye)給(gei)生(sheng)物(wu)行(xing)業(ye)客戶提供生物(wu)實驗(yan)室檢(jian)測(ce)耗(hao)材(cai)，歡(huan)迎廣(guang)大客戶來詢(xun)。