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您現(xian)在(zai)的(de)位置(zhi)：首(shou)頁 > 技(ji)術文章(zhang) > 甘油(you)三酯(TG)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒資(zi)料(liao)
| 甘油(you)三酯(Triglyceride，TG)又(you)稱(cheng)三酰甘油(you)，是(shi)3分子長鏈脂肪酸和(he)甘油(you)形成的(de)脂肪分子，是(shi)人體內(nei)含(han)量(liang)多(duo)的(de)脂類(lei)，大部(bu)分組(zu)織均可(ke)以(yi)利(li)用(yong)甘油(you)三酯分解(jie)產(chan)物供給(gei)能量(liang)，同時肝(gan)臟(zang)、脂肪等組(zu)織還可(ke)以(yi)進(jin)行(xing)甘油(you)三酯的(de)合成，用(yong)酶(mei)學(xue)方(fang)法測(ce)定(ding) TG 是(shi)生(sheng)化(hua)檢測(ce)中(zhong)的(de)常(chang)用(yong)方(fang)法， 其(qi)特(te)點(dian)是(shi)：1、靈(ling)敏(min)度(du)、準(zhun)確(que)度、精(jing)密度(du)均高；2、使用(yong)溫和(he)的(de)反應(ying)條件(jian)；3、操作簡便；4、適(shi)用(yong)於自(zi)動(dong)分析(xi)儀。 本公(gong)司(si)甘油(you)三脂(TG)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(GPO-PAP 單試劑(ji)微(wei)板(ban)法(fa))又(you)稱(cheng)磷酸甘油(you)氧(yang)化(hua)酶(mei)法(fa)或(huo)磷酸甘油(you)氧(yang)化(hua)酶(mei)-過(guo)氧(yang)化(hua)物酶(mei)偶聯(lian)法(fa)等(deng)，其(qi)原理(li)是(shi)甘油(you)三脂被 LPL 水解(jie)為(wei)甘油(you)和脂肪酸，後(hou)者經(jing)甘油(you)激(ji)酶(mei)和(he) ATP 磷酸化(hua)，G-3-P 被磷酸甘油(you)氧(yang)化(hua)酶(mei)(GPO)氧(yang)化(hua)並產(chan)生(sheng)過(guo)氧(yang)化(hua)氫(qing)，再(zai)經(jing)過氧(yang)化(hua)物酶(mei)(POD)催(cui)化(hua)，使 4-氨(an)基安(an)替比林與(yu)酚(fen)(三者合稱(cheng) PAP)反(fan)應(ying)，生成紅色(se)benhun醌亞胺(Trinder 反應)，酶(mei)標(biao)儀在 500~520nm 處(chu)進(jin)行(xing)比色(se)測定(ding)，用(yong)於人或(huo)動(dong)物的(de)血(xue)清、血(xue)漿、腦(nao)脊液、細(xi)胞(bao)、組織等樣本中(zhong)的(de)甘油(you)三脂含(han)量(liang)定(ding)量(liang)測定(ding)。該(gai)試劑(ji)盒僅(jin)用(yong)於科(ke)研(yan)域，不適(shi)用(yong)於臨床(chuang)診(zhen)斷或(huo)其(qi)他(ta)用(yong)途(tu)。 |
| 名稱(cheng) | 規格(ge) | 儲存(cun) | |
| 試劑(ji)(A): GPO-PAP工作液 | Good's Buffer | 30mL | -20℃ 避(bi)光 |
| LPL、GK、GPO | |||
| 過氧(yang)化(hua)物酶(mei)(POD) | |||
| 4-氨基(ji)安(an)替比林 | |||
| 對(dui)氯酚(fen) | |||
| 試劑(ji)(B): Glycerol 標(biao)準(zhun)(1.7mmol/L) | 1mL | 4℃ 避光 | |
| 試(shi)劑(ji)(C): ddH2O | 1mL | RT | |
| 1、生理(li)鹽水或(huo)PBS。 |
| 2、96 孔(kong)板(ban)或(huo)離(li)心管(guan)、小試管(guan)。 |
| 3、水浴(yu)鍋或(huo)恒(heng)溫(wen)箱。 |
| 4、酶(mei)標(biao)儀或(huo)分光光度(du)計。 |
| 5、全(quan)自動(dong)或(huo)半自(zi)動(dong)生(sheng)化(hua)分析(xi)儀。 |
| 壹(yi)、樣本處(chu)理(li) | |||
| 1、血(xue)清、血(xue)漿、腦(nao)脊液樣本：從(cong)待測樣本中(zhong)分離(li)出(chu)的(de)血(xue)清或(huo)血(xue)漿不(bu)應有溶(rong)血(xue)，直接(jie)檢測(ce)，如超過線性範圍(wei)，用(yong)生理(li)鹽水稀釋後(hou)檢測(ce)。 | |||
| 2、細(xi)胞樣本 | |||
| a:取適(shi)量(liang)的(de)細胞(bao)(壹(yi)般推薦＞106以(yi)上)，1000g離(li)心10min，棄上(shang)清，留取沈澱。 | |||
| b:.用(yong) PBS 或(huo)生理(li)鹽水清(qing)洗 1-2 次，1000g離(li)心10min，棄上(shang)清，留取沈澱。 | |||
| c:加(jia)入(ru)200-300μl 的(de)PBS或(huo)生理(li)鹽水勻(yun)漿，冰(bing)浴(yu)條件(jian)下超聲(sheng)破碎細胞(bao)，功率(lv)300W，每(mei)次3-5s，間(jian)隔(ge)30s,重(zhong)復(fu)3-5次；亦(yi)可(ke)手(shou)動(dong)勻(yun)漿(jiang)，制備(bei)好(hao)的(de)勻漿(jiang)液不(bu)可(ke)離(li)心；亦(yi)可(ke)用(yong)1-2% Triton X-100 冰(bing)浴(yu) 30-60min，制備(bei)好(hao)的(de)裂解(jie)液不(bu)可(ke)離(li)心。 | |||
| 3、組織樣本：準(zhun)確(que)稱(cheng)取適(shi)量(liang)組織樣本，按(an)質量(liang)(g)：生理(li)鹽水或(huo)PBS(mL)=1：9的(de)比例，加(jia)入(ru)生理(li)鹽水或(huo)PBS，冰(bing)浴(yu)條件(jian)下手動(dong)或(huo)機械勻(yun)漿，2500-3000g 離(li)心10min，取上(shang)清待用(yong)。 | |||
| 二(er)、酶(mei)標(biao)儀TG測定(ding)操(cao)作: | |||
| 1：按(an)下表(biao)依次加(jia)入(ru)試劑(ji)： | |||
| 加(jia)入(ru)物(μL) | 空白(bai)孔 | 標準(zhun)孔(kong) | 待測孔(kong) |
| ddH2O | 3 | - | - |
| Glycerol 標準(zhun)(1.7mmol/L) | - | 3 | - |
| 待測樣本 | - | - | 3 |
| GPO-PAP 工作液 | 300 | 300 | 300 |
| 2：充分混勻, 37℃水浴(yu)中孵育(yu)5min。 | |||
| 3：酶(mei)標(biao)儀測定(ding) 500-520nm 吸(xi)光度(du)，以空白孔(kong)調零，讀取標(biao)準孔(kong)和(he)各待測孔(kong)的(de)吸光度(du)。 | |||
| 三、分光光度(du)計(1ml 比色(se)杯)、半自動(dong)生(sheng)化(hua)分析(xi)儀 TG 測定(ding)操(cao)作： | |||
| 1、按(an)下表(biao)依次加(jia)入(ru)試劑(ji)： | |||
| 加(jia)入(ru)物(mL) | 空白(bai)管(guan) | 標(biao)準(zhun)管(guan) | 待測管(guan) |
| ddH2O | 0.01 | - | - |
| Glycerol 標(biao)準(zhun)(1.7mmol/L) | - | 0.01 | - |
| 待測樣本 | - | - | 0.01 |
| GPO-PAP 工作液 | 1 | 1 | 1 |
| 2、充分混勻, 37℃水浴(yu)中孵育(yu)5min。 | |||
| 3、分光光度(du)計測定(ding)500-520nm吸(xi)光度(du)，空白管(guan)調零，讀取標(biao)準管(guan)和各待測管(guan)的(de)吸光度(du)。 | |||
| 四(si)、普通(tong)分光光度(du)計(2mL比色(se)杯)TG 測定(ding)操(cao)作: | |||
| 1、按(an)下表(biao)依次加(jia)入(ru)試劑(ji)： | |||
| 加(jia)入(ru)物(mL) | 空白(bai)管(guan) | 標(biao)準(zhun)管(guan) | 待測管(guan) |
| ddH2O | 0.02 | - | - |
| Glycerol 標(biao)準(zhun)(1.7mmol/L) | - | 0.02 | - |
| 待測樣本 | - | - | 0.02 |
| GPO-PAP 工作液 | 2 | 2 | 2 |
| 2、充分混勻, 37℃水浴(yu)中孵育(yu)5min。 | |||
| 3、分光光度(du)計測定(ding)500-520nm吸(xi)光度(du)，空白管(guan)調零，讀取標(biao)準管(guan)和各待測管(guan)的(de)吸光度(du)。 | |||
| 五、全自(zi)動(dong)生(sheng)化(hua)分析(xi)儀 TG 測定(ding)操(cao)作: | |||
| 1、按(an)下表(biao)依次加(jia)入(ru)試劑(ji)： | |||
| 加(jia)入(ru)物((μL) | 空白(bai)管(guan) | 標(biao)準(zhun)管(guan) | 待測管(guan) |
| ddH2O | 3 | - | - |
| Glycerol 標(biao)準(zhun)(1.7mmol/L) | - | 3 | - |
| 待測樣本 | - | - | 3 |
| GPO-PAP 工作液 | 300 | 300 | 300 |
| 2、充分混勻, 37℃水浴(yu)中孵育(yu)5min。 | |||
| 3、全自動(dong)生(sheng)化(hua)分析(xi)儀測定(ding) 500-520nm 波(bo)長(chang)處(chu)吸光度(du)，以空白管(guan)調零，讀取標(biao)準管(guan)和各待測管(guan)的(de)吸光度(du)。 | |||
| 主(zhu)波長(chang)/次波(bo)長(chang) | 500/600nm |
| 反應類(lei)型 | 終點(dian)法(fa) |
| 反(fan)應(ying)方(fang)向 | 升(sheng)反應(ying)(+) |
| 血(xue)清、血(xue)漿等(deng)液體(ti)樣本(空(kong)白(bai)調零)： |
| TG(mmol/L)=｛(待測管(guan)吸光度(du)-空白吸光度(du))/(標準管(guan)吸光度(du)-空白吸光度(du))｝×1.7mmol/L |
| 血(xue)清、血(xue)漿等(deng)液體(ti)樣本(全(quan)自(zi)動(dong)生(sheng)化(hua)分析(xi)儀)： |
| TGmmol/L)=(待測管(guan)吸光度(du)/(標準管(guan)吸光度(du))×1.7mmol/L |
| 細胞、組織等樣本(空(kong)白(bai)調零)： |
| TG(mmol/L)=｛ ( 待 測 管(guan) 吸 光 度(du) - 空 白 吸 光 度(du) )/( 標 準 管(guan) 吸 光 度(du) -空 白 吸 光 度(du) ) ｝×1.7mmol/L÷待測樣本濃(nong)度(du)(mg/mL) |
| 細(xi)胞(bao)、組織等樣本(全(quan)自(zi)動(dong)生(sheng)化(hua)分析(xi)儀)： |
| TG(mmol/L)=(待測管(guan)吸光度(du)/(標準管(guan)吸光度(du))×1.7mmol/L÷待測樣本濃(nong)度(du)(mg/mL) |
| 健康成年(nian)人： |
| 理(li)想(xiang)範(fan)圍(wei)：＜1.7mmol/L(＜150mg/dl) |
| 邊緣(yuan)升(sheng)高：＜1.7-2.25mmol/L(150-199mg/dl) |
| 升(sheng)高：＜2.26-5.64mmol/L(200-499mg/dl) |
| 很(hen)高：≥565mmol/L(≥500mg/dl) |
| 外觀 | 無色(se)至淡(dan)黃色(se)澄(cheng)清液體(ti) |
| 線(xian)性範圍 | 0.05-9.0mmol/L(4~790mg/dl)，R2>0.98 |
| 靈(ling)敏(min)度(du) | 檢測(ce)下(xia)限(xian) 0.05mmol/L(4mg/dl) |
| 變異(yi)系數 | 批(pi)內(nei)<5%，批間(jian)<8%，總誤(wu)差(cha)<10% |
| 空白(bai)吸光值 | <0.2(1cm 光徑(jing)) |
| 幹擾(rao)因(yin)素(su) | 膽(dan)紅素(su)<205μmol/L；血(xue)紅蛋白<6g/L；EDTA、肝(gan)素(su)抗凝時(shi)，對(dui)結(jie)果(guo)無明(ming)顯影響(xiang)。 |
| 穩(wen)定(ding)性(xing) | 密閉，6個月 |
| 1、上述(shu)低(di)溫試劑(ji)避(bi)免(mian)反復凍(dong)融，以(yi)免失(shi)效(xiao)或(huo)效(xiao)率下(xia)降(jiang)。 |
| 2、本(ben)法(fa)可(ke)直(zhi)接(jie)用(yong)於檢測(ce)腦(nao)脊液中(zhong)的(de)TG含(han)量(liang)，但(dan)不能直接(jie)檢測(ce)尿液中(zhong)的(de)TG含(han)量(liang)，因(yin)為(wei)未(wei)經(jing)處(chu)理(li)的(de)尿液中(zhong)含(han)有還原性物質，影(ying)響(xiang)過(guo)氧(yang)化(hua)物酶(mei)反(fan)應(ying)。 |
| 3、待測樣本如不(bu)能及時(shi)測(ce)定(ding)，應(ying)置(zhi)於(yu)2-8℃保(bao)存(cun)，3天(tian)內(nei)穩定(ding)。 |
| 4、本(ben)法(fa)線性範圍(wei)可(ke)達(da)9.0mmol/L，如果(guo)樣本TG濃(nong)度(du)過高，結果(guo)可(ke)能呈假性(xing)降(jiang)低(di)，應用(yong)生理(li)鹽水稀釋後(hou)重(zhong)測，結果(guo)乘(cheng)以稀釋倍(bei)數。 |
| 有效(xiao)期(qi)： | -20℃ 避(bi)光， 6個月有效(xiao)。 |
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