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          低(di)吸(xi)附(fu)離心(xin)管(guan)的(de)壹些(xie)關(guan)鍵(jian)點(dian),看(kan)完(wan)這些(xie)讓妳(ni)不(bu)踩(cai)坑(keng)!
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            低(di)吸(xi)附(fu)離心(xin)管(guan)常(chang)用(yong)於對蛋白質進(jin)行(xing)濃縮和(he)除(chu)鹽操作(zuo),對色譜洗(xi)液(ye)和(he)生理(li)梯(ti)度(du)片斷(duan)進(jin)行(xing)緩(huan)沖液交(jiao)換(huan)或(huo)者(zhe)除(chu)鹽操作(zuo),從細胞的(de)細菌(jun)培(pei)養(yang)上(shang)清液(ye)或(huo)者(zhe)溶(rong)菌(jun)液中回收(shou)生物(wu)分(fen)子(zi)。清洗(xi)和(he)濃(nong)縮乳膠(jiao)懸浮液,離心(xin)管(guan)通常(chang)不(bu)需要預(yu)處理(li)即可使用,不(bu)過(guo)對於(yu)蛋白質樣(yang)本(ben)處理(li),特別(bie)是較稀的(de)蛋白溶(rong)液來說,用(yong)膜濃縮,回收(shou)率(lv)常(chang)常(chang)是(shi)不(bu)定(ding)量(liang)的(de),雖然(ran)PES材料(liao)使非特異性吸(xi)附(fu)最(zui)小(xiao)化,但是,某些(xie)蛋白,特別(bie)是稀的(de)時(shi)候(hou)會有(you)問(wen)題(ti),非(fei)特異性結(jie)合(he)的(de)程(cheng)度(du)隨著個(ge)別(bie)蛋白結(jie)構(gou)的(de)不(bu)同(tong)而不(bu)同(tong),含(han)有帶電的(de)或者(zhe)疏(shu)水結(jie)構(gou)的(de)蛋白質更(geng)易於(yu)不(bu)可逆結(jie)合(he)到(dao)不(bu)同(tong)表(biao)面(mian)。
           
            低(di)吸附(fu)離心(xin)管(guan)離心(xin)時(shi)註意(yi)事(shi)項:避免過(guo)長時(shi)間或(huo)者(zhe)高(gao)速(su)離心(xin),雖(sui)然(ran)我(wo)們(men)產(chan)品(pin)有防(fang)死端設計(ji),可避免過(guo)度離心(xin)造成(cheng)膜表面(mian)幹燥而造成(cheng)不(bu)可逆吸附(fu),避免過(guo)度濃(nong)縮,終(zhong)體(ti)積越小(xiao),越容(rong)易因(yin)表面(mian)吸(xi)附(fu)而損(sun)失得率(lv),離心(xin)後(hou)采(cai)用(yong)輕輕吹吸幾次濾膜截留(liu)的(de)溶(rong)液,必要(yao)時(shi)補加(jia)壹(yi)定體(ti)積的(de)緩(huan)沖液沖洗(xi)膜表面(mian),有助於減少膜表面(mian)吸附(fu),能(neng)提(ti)高(gao)回(hui)收(shou)率(lv),盡(jin)量(liang)避免TIPS接(jie)觸膜表面(mian)。
           
            對於低(di)吸附(fu)離心(xin)管(guan)表面(mian)做(zuo)鈍化(hua)預(yu)處理(li)可降(jiang)低蛋白質在(zai)膜表面(mian)的(de)吸附(fu)性損(sun)失,大(da)多(duo)數(shu)情(qing)況(kuang)下,在(zai)濃縮稀釋(shi)蛋白溶(rong)液之(zhi)前預(yu)處理(li)柱子(zi)可以提高(gao)回(hui)收(shou)率(lv),因(yin)為(wei)溶(rong)液可填滿(man)膜和(he)表(biao)面暴露(lu)的(de)空(kong)白蛋白吸附(fu)位(wei)點(dian),鈍化(hua)的(de)方法(fa)是預(yu)先用(yong)高(gao)容(rong)積的(de)鈍化(hua)溶(rong)液預(yu)浸(jin)泡(pao)柱子(zi)壹(yi)小(xiao)時(shi)以(yi)上,蒸(zheng)餾水(shui)*沖洗(xi)柱子(zi),再用蒸(zheng)餾水(shui)離心(xin)壹(yi)次以(yi)*除(chu)去可能殘留(liu)在(zai)膜上的(de)鈍化(hua)溶(rong)液,註意(yi)鈍化(hua)處理(li)後別(bie)讓膜幹了(le),如果(guo)要(yao)留(liu)待以後使用,需要加(jia)無(wu)菌(jun)蒸餾水(shui)保持(chi)膜濕潤(run)。
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