天津本生-如(ru)何科(ke)學正確(que)地使用凍存(cun)管呢?

　　凍存(cun)管的使用是(shi)壹(yi)門學問，並不(bu)是(shi)打開(kai)液(ye)氮(dan)罐、放入凍存(cun)管、關上液(ye)氮(dan)罐這樣簡(jian)單(dan)的三部(bu)曲可以(yi)完(wan)成的。科(ke)學正確(que)地使用凍存(cun)管，可以(yi)避(bi)免(mian)樣本(ben)的損失(shi)，並保護試驗(yan)人員的安全。下面(mian)便(bian)是(shi)天(tian)津本(ben)生小編(bian)的詳(xiang)解(jie)，不(bu)放來(lai)看(kan)看(kan)。

　　凍存(cun)管：冷凍步(bu)驟

　　用預(yu)熱的PBS溶液(ye)洗(xi)滌細(xi)胞(bao)，吸取溶液(ye)，含(han)有(you)胰蛋白酶和(he)EDTA的溶液(ye)覆(fu)蓋(gai)細胞(bao)(薄薄(bo)的液(ye)層(ceng)足夠(gou)，胰蛋白酶和(he)EDTA的濃度(du)需要(yao)根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)系確(que)定(ding))。

　　37℃孵育(yu)細(xi)胞(bao)3-5分鐘(zhong)。

　　細胞(bao)從底(di)部(bu)脫離(li)之後(hou)，終(zhong)止(zhi)孵(fu)育(yu)，加(jia)入含有(you)血清(qing)的培養基(ji)，用移(yi)液(ye)器(qi)輕輕地懸浮(fu)細(xi)胞(bao)。

　　離(li)心細胞(bao)懸液(ye)(500 x g, 5分鐘(zhong))，用含(han)有(you)血清(qing)的培養基(ji)重新懸浮。

　　細胞(bao)計(ji)數。

　　離(li)心細胞(bao)懸液(ye)(500 x g, 5分鐘(zhong))，去除上清(qing)液(ye)，用適(shi)量體積(ji)的含有(you)血清(qing)的培養基(ji)重新懸浮細胞(bao)。

　　以(yi)1:1體積(ji)比(bi)混合細(xi)胞(bao)和凍存(cun)液(ye)(60%培(pei)養基(ji)，20%胎牛(niu)血(xue)清(qing)，20% DMSO)，然後(hou)轉(zhuan)移(yi)到Cryo.sTM凍存(cun)管中。凍存(cun)的細胞(bao)密度(du)為 1-5×106  個(ge)/毫升(sheng)。

　　含有(you)細胞(bao)的Cryo.sTM凍存(cun)管建議以(yi)−1 K / min  的速(su)率降溫，可以(yi)將(jiang)凍存(cun)管置(zhi)於−70℃含(han)有(you)異丙醇的容(rong)器(qi)中(zhong)。如(ru)果Cryo.sTM凍存(cun)管存儲(chu)其(qi)他樣品(pin)，可以(yi)直(zhi)接放置(zhi)在−20℃，−70℃或(huo)者液(ye)氮(dan)的氣(qi)相。為(wei)了確(que)保樣品(pin)冷(leng)凍均(jun)勻(yun)，4  mL和5 mL的Cryo.sTM凍存(cun)管需要(yao)先(xian)置(zhi)於在(zai)−20℃冰箱過夜(ye)，然後再轉(zhuan)移(yi)到−70℃或(huo)者液(ye)氮(dan)的氣(qi)相。

　　然(ran)後轉(zhuan)移(yi)Cryo.sTM凍存(cun)管到液(ye)氮(dan)罐。為(wei)了避(bi)免(mian)汙(wu)染(如(ru)支原體)和(he)安(an)全考(kao)慮(lv)，請將Cryo.sTM凍存(cun)管置(zhi)於液(ye)氮(dan)的氣(qi)相，切勿置(zhi)於液(ye)相(xiang)。

　　如(ru)何科(ke)學正確(que)地使用凍存(cun)管?我(wo)司由具(ju)有(you)行業背(bei)景和豐富(fu)市(shi)場經驗(yan)的業人(ren)士組(zu)成，於(yu)為(wei)生命科(ke)學研究域(yu)提(ti)供(gong)產(chan)品(pin)，為(wei)廣大(da)科(ke)研工作(zuo)者提(ti)供(gong)服(fu)務(wu)。  既能(neng)滿足(zu)研發(fa)類(lei)客戶(hu)對產(chan)品(pin)種類(lei)、包裝(zhuang)的特殊(shu)要(yao)求(qiu)，也能(neng)滿足(zu)生(sheng)產(chan)型企(qi)業從小試、中試到規模化生(sheng)產(chan)各(ge)個(ge)階段的綜合需(xu)求(qiu)。本生(sheng)!您信任(ren)的合作(zuo)夥(huo)伴。我(wo)們(men)願與(yu)您真誠(cheng)合作(zuo)，共(gong)創(chuang)美好(hao)的未(wei)來(lai)。