細(xi)胞(bao)爬片的(de)操(cao)作(zuo)方(fang)法以及(ji)技巧(qiao)!

　　在(zai)醫(yi)學生物(wu)研究(jiu)中(zhong)，免疫(yi)熒(ying)光檢(jian)測(ce)等(deng)需用到細(xi)胞(bao)爬片。現(xian)有的(de)細(xi)胞(bao)爬片多(duo)采(cai)用表(biao)面平整(zheng)、光滑的(de)透(tou)明(ming)玻(bo)璃玻(bo)片(pian)。但在(zai)做(zuo)免疫(yi)熒(ying)光檢(jian)測(ce)時(shi)，為了(le)節(jie)約(yue)抗體，需免疫(yi)組(zu)化(hua)筆在(zai)爬片上進(jin)行範(fan)圍(wei)的(de)圈(quan)定，將抗體加入劃(hua)定區(qu)域(yu)，免疫(yi)組(zu)化(hua)筆中(zhong)的(de)疏(shu)水成(cheng)分(fen)阻滯抗體溢出(chu)所(suo)圈(quan)定的(de)範圍(wei)，從(cong)而達(da)到節約抗體的(de)目的(de)。細(xi)胞(bao)爬片是(shi)細(xi)胞(bao)培養中(zhong)比較(jiao)經常會用到的(de)，現(xian)將(jiang)自(zi)己(ji)操(cao)作(zuo)的(de)壹些(xie)方(fang)法與技巧(qiao)拿(na)與(yu)大家(jia)分享。

　　細(xi)胞(bao)爬片的(de)特點(dian):

　　1.玻(bo)片(pian)表(biao)面經過TC處(chu)理(li)，雙(shuang)面(mian)均可使用。

　　2.γ射線(xian)滅(mie)菌，保(bao)證無(wu)菌。

　　3.使用便捷，只需打開(kai)包(bao)裝，將(jiang)爬片放入孔(kong)板(ban)內(nei)，將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液滴到爬片上即(ji)可培(pei)養。

　　4.爬片厚度為0.17mm，直徑為8mm/14mm/20mm/25mm.分別(bie)適(shi)用於(yu)48孔(kong)細(xi)胞(bao)培養板(ban)/24孔(kong)細(xi)胞(bao)培養板(ban)/12孔(kong)細(xi)胞(bao)培養板(ban)/6孔(kong)細(xi)胞(bao)培養板(ban)。

　　5.*吸附：該(gai)玻片(pian)表(biao)面具有的(de)陽離子電荷(he)，可以(yi)通過靜電作(zuo)用吸附冰(bing)凍(dong)切(qie)片(pian)組(zu)織或細(xi)胞(bao)，使之粘(zhan)附在(zai)玻(bo)片上，進(jin)而在(zai)玻(bo)璃和切(qie)片(pian)組(zu)織之間形成(cheng)共價鍵.因(yin)此(ci)，無需粘(zhan)黏(nian)劑或者(zhe)蛋白包(bao)被，該(gai)玻片也能牢(lao)固的(de)粘(zhan)附切(qie)片(pian)或細(xi)胞(bao)。

　　爬片的(de)準備:

　　1、爬片可用(yong)壹般(ban)的(de)蓋(gai)玻(bo)片，也可用(yong)專用爬片;

　　2、應(ying)用蓋(gai)玻(bo)片，可根據自己(ji)的(de)需要(yao)剪(jian)裁成(cheng)合(he)適(shi)的(de)大小(xiao)，以備(bei)置於6孔(kong)板(ban)、12孔(kong)板(ban)或24孔(kong)板(ban);

　　3、將(jiang)剪(jian)裁好的(de)爬片，置於濃(nong)硫酸(suan)中(zhong)浸泡(pao)並(bing)過(guo)夜(ye)，第二天先(xian)用(yong)自(zi)來(lai)水沖(chong)洗20遍，再用(yong)三(san)蒸水沖(chong)洗3遍(個(ge)人認為主要(yao)目的(de)是(shi)沖(chong)洗幹(gan)凈(jing)就(jiu)可以(yi)了(le))，放(fang)在(zai)飯(fan)盒或者(zhe)培養(yang)皿(min)(壹定是(shi)玻(bo)璃的(de)哦，要(yao)不然(ran)就……)中(zhong)烘(hong)幹(gan)後(hou)進(jin)行高壓消(xiao)毒(du)。

　　培(pei)養(yang)板(ban)的(de)準備:

　　1、泡(pao)酸(suan)過(guo)夜(ye)

　　2、沖(chong)洗，烘(hong)幹(gan)(1、2步驟與前大致(zhi)相(xiang)同(tong))

　　3、放(fang)入超(chao)凈(jing)工(gong)作(zuo)臺用紫(zi)外(wai)線(xian)照(zhao)1～2小(xiao)時(shi)就可以(yi)用了(le)(在(zai)照(zhao)之前可以(yi)將爬片壹並放(fang)入，若(ruo)細(xi)胞(bao)貼壁(bi)能力不(bu)強(qiang)，可經多(duo)聚賴(lai)氨(an)酸浸片後(hou)放(fang)入。貼壁(bi)能力強(qiang)的(de)話，就可以(yi)省略(lve)了(le)，進(jin)行紫(zi)外(wai)線(xian)消(xiao)毒(du))

　　註(zhu)：此(ci)步自己的(de)經驗是(shi)爬片可以(yi)先(xian)浸入消(xiao)毒(du)後(hou)的(de)PBS內，緊(jin)接(jie)著(zhe)放(fang)入培養(yang)板(ban)內(nei)。目的(de)：浸過PBS的(de)爬片依靠表(biao)面的(de)液體，可以(yi)用培養板(ban)孔(kong)底貼和緊(jin)密(mi)，以(yi)利(li)於細(xi)胞(bao)長到爬片上。(自(zi)己(ji)剛開(kai)始(shi)做(zuo)的(de)時(shi)候(hou)，經常就是(shi)細(xi)胞(bao)全都長在(zai)了(le)爬片與培養(yang)板(ban)之間，爬片上細(xi)胞(bao)罕(han)見(jian)。)

　　細(xi)胞(bao)爬片:

　　1、胰酶消(xiao)化細(xi)胞(bao)後(hou)計數(shu)

　　2、根據自己(ji)的(de)需要(yao)選擇(ze)合(he)適(shi)的(de)細(xi)胞(bao)密度種入培養(yang)板(ban)內(nei)即(ji)可

　　3、第(di)二天即(ji)可進(jin)行幹(gan)預措施

　　細(xi)胞(bao)爬片的(de)操(cao)作(zuo)方(fang)法以及(ji)技巧(qiao)!先(xian)和大家(jia)介(jie)紹(shao)到這，如果(guo)想(xiang)要(yao)了(le)解(jie)更多(duo)細(xi)胞(bao)爬片的(de)信(xin)息(xi)，可以(yi)關註天津本生，本生給生物(wu)醫(yi)藥(yao)客戶(hu)提供(gong)生物實驗室檢(jian)測(ce)試劑及耗(hao)材，歡迎廣大客(ke)戶來(lai)詢。