影(ying)響ELISA試(shi)劑盒(he)測(ce)定(ding)成(cheng)果的原(yuan)因(yin)和(he)解決(jue)辦(ban)法(fa)

　　ELISA試(shi)劑盒(he)方(fang)法(fa)被(bei)廣(guang)泛應(ying)用於各種(zhong)抗原(yuan)和(he)抗(kang)體(ti)測定(ding)，具(ju)有(you)靈(ling)敏度(du)高，操(cao)作(zuo)簡(jian)略等(deng)優點，但是在(zai)詳(xiang)細(xi)實(shi)驗過(guo)程中影(ying)響要(yao)素(su)較(jiao)多，而且(qie)要(yao)按照嚴厲(li)的(de)闡(chan)明(ming)要求(qiu)，在(zai)臨(lin)床檢驗中(zhong)除(chu)正(zheng)常反響外，有(you)時(shi)常(chang)可見(jian)到(dao)壹(yi)些(xie)錯(cuo)誤成(cheng)果(即假(jia)陽(yang)性(xing)或(huo)假(jia)陰性成(cheng)果)。

　　影(ying)響ELISA測(ce)定(ding)錯(cuo)誤成(cheng)果的(de)原(yuan)因(yin)主(zhu)要(yao)有：

　　①標(biao)本(ben)要素(su);

　　②試劑要(yao)素(su);

　　③操(cao)作(zuo)要(yao)素(su)。

　　壹(yi)、類(lei)風濕(shi)因(yin)子

　　人血(xue)清(qing)中(zhong)IgM、IgG型類(lei)風濕(shi)因(yin)子(RF)能夠(gou)與(yu)ELISA系統(tong)中(zhong)的捕(bu)獲(huo)抗(kang)體(ti)及(ji)酶符號(hao)二抗的FC段(duan)直(zhi)接(jie)結(jie)合(he)，然(ran)後導致(zhi)假(jia)陽(yang)性(xing)。

　　解決(jue)辦(ban)法(fa):

　　1.用F(ab)2替(ti)代完好的(de)IgG;

　　2.標(biao)本(ben)用聯有熱(re)變性(63℃，10 min)IgG的固(gu)相(xiang)吸附劑處理(li)(將熱(re)變性IgG加(jia)入到(dao)標(biao)本(ben)稀(xi)釋(shi)液(ye)中同(tong)樣(yang)有用);

　　3.檢測抗(kang)原(yuan)時(shi)，能(neng)夠(gou)用2-巰基(ji)yi醇(chun)等(deng)加(jia)入到(dao)標(biao)本(ben)稀(xi)釋(shi)液(ye)中，使(shi)RF降解。

　　二、補體

　　ELISA系統(tong)中(zhong)固(gu)相(xiang)壹(yi)抗(kang)和符號(hao)二抗過(guo)程中，抗體分(fen)子發作(zuo)變構，其FC段(duan)的補體C1q分(fen)子結合(he)位(wei)點被(bei)暴露(lu)出來，使(shi)C1q 能(neng)夠將二者(zhe)連(lian)接(jie)起來，然後形成(cheng)假(jia)陽(yang)性(xing)。

　　解決(jue)辦(ban)法(fa):

　　1.用EDTA稀(xi)釋(shi)標(biao)本(ben);

　　2.用53℃，10 min或56℃，30 min加(jia)熱血(xue)清(qing)使(shi)C1q滅(mie)活(huo)。

　　三、嗜異(yi)性抗(kang)體

　　人類血清(qing)中(zhong)含有能(neng)與(yu)嚙(nie)齒(chi)類動物(wu)(如(ru)鼠等)Ig(s) 結合的(de)天然(ran)嗜(shi)異(yi)性抗(kang)體，可將ELISA系統(tong)中(zhong)壹(yi)抗(kang)和二抗連接(jie)起來，也能(neng)形成(cheng)假(jia)陽(yang)性(xing)。

　　解決(jue)辦(ban)法(fa):

　　可在(zai)標(biao)本(ben)稀(xi)釋(shi)液(ye)中加(jia)入過(guo)量(liang)的(de)動(dong)物(wu)Ig(s)，但加(jia)入量不(bu)足(zu)或亞類不同(tong)時無效(xiao)。

　　四(si)、嗜(shi)靶抗原(yuan)的(de)本(ben)身抗(kang)體

　　抗甲狀(zhuang)腺球蛋(dan)白、抗(kang)胰(yi)島(dao)素(su)等嗜靶抗原(yuan)的(de)本(ben)身抗(kang)體，有時能與(yu)靶抗(kang)原(yuan)結(jie)合(he)形成(cheng)復(fu)合(he)物，在(zai)ELISA方(fang)法(fa)中均可幹(gan)擾(rao)抗(kang)原(yuan)抗(kang)體(ti)測(ce)定(ding)成(cheng)果。

　　解決(jue)辦(ban)法(fa):

　　測(ce)定(ding)前(qian)需用理化(hua)方(fang)法(fa)將其(qi)解離(li)後(hou)再測定(ding)

　　影(ying)響ELISA試(shi)劑盒(he)測(ce)定(ding)成(cheng)果的原(yuan)因(yin)和(he)解決(jue)辦(ban)法(fa)! 先(xian)和(he)大(da)家(jia)介(jie)紹到(dao)這(zhe)，如(ru)果(guo)想(xiang)要了解更(geng)多(duo)ELISA試劑盒(he)信(xin)息，可以(yi)關註天津(jin)本(ben)生生(sheng)物，專(zhuan)業給(gei)生(sheng)物(wu)醫(yi)藥(yao)客(ke)戶(hu)提供生(sheng)物(wu)實驗(yan)室檢測耗材，歡迎廣大客(ke)戶(hu)來詢。