本(ben)試(shi)劑(ji)盒只能(neng)用(yong)於(yu)科學研究(jiu)，不(bu)得用(yong)於(yu)醫學診(zhen)斷。

人(ren)抗BB抗體(BB-Ab)ELISA試劑(ji)盒使(shi)用(yong)說(shuo)明書

【 試劑(ji)盒名(ming)稱】

人抗(kang)BB抗體(ti)(BB-Ab)ELISA試(shi)劑(ji)盒

【試(shi)劑(ji)盒用(yong)途(tu)】

定量(liang)檢(jian)測(ce)人血清、血漿及相(xiang)關液體樣本中抗BB抗(kang)體(BB-Ab)的(de)含(han)量(liang)。

【檢(jian)測(ce)原理(li)】

本(ben)試劑(ji)盒采(cai)用(yong)雙(shuang)抗體(ti)兩(liang)步(bu)夾(jia)心酶(mei)聯(lian)免疫吸附法(fa)(ELISA)。將(jiang)標(biao)準品(pin)、待測(ce)樣本(ben)加(jia)入到(dao)預(yu)先(xian)包被抗(kang)BB抗體(ti)(BB-Ab)透(tou)明酶(mei)標(biao)包被板(ban)中，溫(wen)育(yu)足夠(gou)時間後，洗(xi)滌(di)除(chu)去未(wei)結(jie)合(he)的成(cheng)分，再加(jia)入酶(mei)標(biao)工作液，溫(wen)育(yu)足夠(gou)時間後，洗(xi)滌(di)除(chu)去未(wei)結(jie)合(he)的成(cheng)分。依(yi)次加(jia)入底(di)物(wu)A、B，底物(wu)(TMB)在辣(la)根過(guo)氧化(hua)物酶(mei)(HRP)催(cui)化(hua)下(xia)轉化(hua)為藍(lan)色產(chan)物(wu)，在酸(suan)的(de)作用(yong)下(xia)變成(cheng)黃(huang)色，顏(yan)色的(de)深淺與(yu)樣(yang)品(pin)中(zhong)抗(kang)BB抗體(ti)(BB-Ab)濃度呈(cheng)正(zheng)相(xiang)關，450nm波長下(xia)測定OD值(zhi)，根據標(biao)準品(pin)和(he)樣品(pin)的(de)OD值(zhi)，計算(suan)樣(yang)本中(zhong)抗(kang)BB抗體(ti)(BB-Ab)含(han)量(liang)。

【試劑(ji)盒組(zu)成(cheng)】

1酶(mei)標(biao)包被板(ban)12孔×8條7底物夜A6mL

2標(biao)準品(pin)：200ng/ml0.6mL8底(di)物(wu)夜B6mL

320倍濃(nong)縮洗滌(di)液(ye)20mL9終止(zhi)液6mL

4標(biao)準品(pin)稀(xi)釋液6mL10說(shuo)明書1份

5樣(yang)本(ben)稀(xi)釋液6mL11封(feng)板(ban)膜1張(zhang)

6酶(mei)標(biao)試劑(ji)6mL12密封(feng)袋(dai)1個

備註：標(biao)準品(pin)用(yong)標(biao)準品(pin)稀(xi)釋液依(yi)次稀(xi)釋為：200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml

【人(ren)抗(kang)BB抗體(BB-Ab)ELISA試(shi)劑(ji)盒需(xu)要(yao)而未提(ti)供的試(shi)劑(ji)和(he)器(qi)材(cai)】

1、37℃恒溫(wen)箱(xiang)

標(biao)準規格(ge)酶(mei)標(biao)儀(yi)

精密(mi)移(yi)液器(qi)及壹次性(xing)吸頭

蒸餾(liu)水

壹次性(xing)試管

吸水紙(zhi)

【操(cao)作步(bu)驟】

1、準備：從(cong)冰箱(xiang)取出(chu)試劑(ji)盒，室(shi)溫(wen)復溫(wen)平衡(heng)30分鐘。

2、配液：用(yong)蒸餾(liu)水將(jiang)20倍濃(nong)縮洗滌(di)液(ye)稀(xi)釋成(cheng)原倍的(de)洗(xi)滌(di)液(ye)。

3、加(jia)標(biao)準品(pin)和(he)待測(ce)樣本(ben)：取足夠(gou)數(shu)量(liang)的酶(mei)標(biao)包被板(ban)，固定(ding)於(yu)框架上，分別(bie)設(she)置標(biao)準品(pin)孔、待測(ce)樣本(ben)孔和(he)空白(bai)對(dui)照孔，記(ji)錄各孔位(wei)置，在標(biao)準品(pin)孔中(zhong)加(jia)入標(biao)準品(pin)50μL;待測(ce)樣本(ben)孔中(zhong)先加(jia)入待測(ce)樣本(ben)10μL，再加(jia)樣本(ben)稀(xi)釋液40μL(即(ji)樣(yang)本稀(xi)釋5倍);空白(bai)對(dui)照孔不(bu)加(jia)。

4、溫(wen)育(yu)：37℃水浴(yu)鍋或恒溫(wen)箱(xiang)溫(wen)育(yu)30min。

5、洗板(ban)：棄(qi)去(qu)液體，吸水紙(zhi)上拍(pai)幹(gan)，每孔加(jia)滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)，靜(jing)置1min，甩去(qu)洗滌(di)液(ye)，吸水紙(zhi)上拍(pai)幹(gan)，如(ru)此重復洗(xi)板(ban)4次(也可用(yong)洗(xi)板機(ji)按(an)說(shuo)明書操作洗板(ban))。

6、加(jia)酶(mei)標(biao)工作液：每孔加(jia)入酶(mei)標(biao)工作液50μL，空白(bai)對(dui)照孔不(bu)加(jia)。

7、溫(wen)育(yu)：重復4的(de)操(cao)作。

8、洗板(ban)：重(zhong)復5的(de)操(cao)作。

9、顯色：每孔先(xian)加(jia)入顯色劑(ji)A 液50μL，再加(jia)入顯色劑(ji)B液 50μL，37℃避(bi)光顯色15min。

10、終(zhong)止(zhi)：取出(chu)酶(mei)標(biao)板，每孔加(jia)終止(zhi)液50μL，終止(zhi)反應(顏色由藍色立轉黃(huang)色)。

11、測(ce)定：以空白(bai)孔調(tiao)零(ling)，在(zai)終(zhong)止(zhi)後15分鐘內，用(yong)450nm波(bo)長測(ce)量(liang)各孔的(de)吸光值(OD值(zhi))。

12、計算(suan)：根(gen)據標(biao)準品(pin)的(de)濃(nong)度及對(dui)應的(de)OD值，計算(suan)出(chu)標(biao)準曲線(xian)的(de)直(zhi)線(xian)回歸方程，再根據(ju)樣(yang)本的OD值(zhi)，在回歸方程上計算(suan)出(chu)對(dui)應的(de)樣品(pin)濃(nong)度，也可以使(shi)用(yong)各種(zhong)應(ying)用(yong)軟件(jian)來(lai)計算(suan)。終(zhong)濃度為實(shi)際(ji)測定濃度乘以(yi)稀(xi)釋倍數(shu)。

人抗(kang)BB抗體(BB-Ab)ELISA試劑(ji)盒使(shi)用(yong)說(shuo)明書

【樣本(ben)要(yao)求】

1、樣本(ben)不(bu)能含(han)疊(die)氮(dan)鈉(na)(NaN3)，因為(wei)疊氮(dan)鈉(na)(NaN3)是辣(la)根過(guo)氧化(hua)物酶(mei)(HRP)的(de)抑(yi)制劑(ji)。

2、標(biao)本采集後盡(jin)早(zao)進(jin)行(xing)提(ti)取，提(ti)取按(an)相(xiang)關文獻進(jin)行(xing)，提(ti)取後應(ying)盡(jin)快(kuai)進(jin)行(xing)實(shi)驗(yan)。若(ruo)不(bu)能立即(ji)試(shi)驗(yan)，可(ke)將(jiang)標(biao)本放於(yu)-20℃保存，但(dan)應避(bi)免反(fan)復凍(dong)融(rong)。

3、樣本應充分離(li)心，不(bu)得有溶血及顆粒。

【人抗BB抗體(ti)(BB-Ab)ELISA試劑(ji)盒註意(yi)事(shi)項】

1、實(shi)驗(yan)嚴(yan)格按(an)照(zhao)說(shuo)明書的操(cao)作進(jin)行(xing)，實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)判(pan)定(ding)必須(xu)以(yi)酶(mei)標(biao)儀(yi)讀數(shu)為準。

2、酶(mei)標(biao)包被板(ban)開封(feng)後如(ru)未(wei)用(yong)完，應(ying)立即(ji)裝入密(mi)封(feng)袋(dai)中加(jia)幹燥(zao)劑(ji)保存。

3、建議所(suo)有的(de)標(biao)準品(pin)、樣(yang)本(ben)和(he)空白(bai)對(dui)照都(dou)做雙(shuang)份檢(jian)測(ce)，取平均值(zhi)，以(yi)減小(xiao)實(shi)驗(yan)誤(wu)差。

4、牢(lao)記樣(yang)本已(yi)經稀(xi)釋5倍，計算(suan)結(jie)果(guo)乘以(yi)5才(cai)是樣(yang)本實(shi)際(ji)濃度。

5、本試(shi)劑(ji)盒定(ding)量(liang)範圍(wei)為0.1-200ng/ml，超過此範圍(wei)，為標(biao)準曲線(xian)延伸(shen)計算(suan)所(suo)得，不(bu)做為準確定(ding)量(liang)結(jie)果(guo)，請用(yong)特殊稀(xi)釋液稀(xi)釋後測(ce)定準確結(jie)果(guo)(0.1-200ng/ml範圍(wei)內)，乘以(yi)總(zong)稀(xi)釋倍數(shu)即(ji)為(wei)樣本終濃度。

6、若顯色過(guo)淺，可(ke)適當延長(chang)底(di)物溫(wen)育(yu)時間。

7、為避(bi)免交叉汙(wu)染，標(biao)準品(pin)、樣(yang)本(ben)和(he)空白(bai)對(dui)照每加(jia)壹個就(jiu)要(yao)更換壹次吸頭;酶(mei)標(biao)工作液、樣(yang)本(ben)稀(xi)釋液和(he)底物(wu)等(deng)公(gong)共(gong)組(zu)分，要(yao)懸臂加(jia)樣，不(bu)得碰到(dao)微(wei)孔;不(bu)得重復使(shi)用(yong)封(feng)板膜。

8、試劑(ji)盒保(bao)質期(qi)內使(shi)用(yong)，不(bu)同批(pi)號的(de)試(shi)劑(ji)不(bu)得混用(yong)。

9、底(di)物B對(dui)光敏(min)感，避免長(chang)時間暴露於(yu)光下(xia)。

【操作程序(xu)總(zong)結(jie)】

準備試(shi)劑(ji)，樣品(pin)和(he)標(biao)準品(pin) 加(jia)入準備好(hao)的(de)樣品(pin)和(he)標(biao)準品(pin)，37℃反(fan)應(ying)30分鐘

洗板(ban)4次，加(jia)入酶(mei)標(biao)試劑(ji)，37℃反應(ying)30分鐘

洗板(ban)4次，加(jia)入顯色液(ye)A、B，37℃顯色15分鐘

加(jia)入終(zhong)止(zhi)液

15分鐘之內讀OD值

計算(suan)

【檢(jian)測(ce)範圍(wei)】

0.1-200ng/ml

【規格】

96T/盒(he)、48T/盒(he)

【貯藏】

2-8℃，避光防潮(chao)保存。

【有效期(qi)】

6個月(yue)

【供應商(shang)】

天(tian)津本(ben)生