elisa試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)應(ying)用(yong)原理(li)-本(ben)生(sheng)（天津）健(jian)康科(ke)技(ji)有(you)限公(gong)司(si)

產品目(mu)錄/ PRODUCT MENU

技(ji)術支(zhi)持

您現在(zai)的位(wei)置(zhi)：首(shou)頁 > 技(ji)術文(wen)章(zhang) > elisa試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)應(ying)用(yong)原理(li)

elisa試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)應(ying)用(yong)原理(li)

更(geng)新(xin)時間：2020-07-30瀏覽：1811次

elisa試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)應(ying)用(yong)原理(li)

ELISA檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)應(ying)用(yong)定(ding)性夾心(xin)免(mian)疫檢(jian)測技(ji)術，用(yong)合(he)成(cheng)的HEV多(duo)肽抗(kang)原包被(bei)微(wei)孔板(ban)板(ban)條，這(zhe)些(xie)多(duo)肽是HEV毒(du)株核(he)心(xin)氨(an)基酸序列(lie)中(zhong)抗(kang)原性很強(qiang)的肽段，分別來自於該毒株的(de)開(kai)放閱(yue)讀(du)框2和開(kai)放(fang)閱讀(du)框3。將樣品(pin)或(huo)標(biao)準(zhun)品加(jia)入(ru)孔(kong)中(zhong)並(bing)孵(fu)育，如果其(qi)中(zhong)存(cun)在(zai)HEV IgM抗體(ti)，這些(xie)抗體就會與HEV 的多肽抗(kang)原結合(he)，並(bing)固定(ding)在(zai)上(shang)面(mian)，洗(xi)板(ban)除(chu)去(qu)其(qi)它(ta)非(fei)特異性抗(kang)體和(he)樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)其(qi)它(ta)成(cheng)份(fen)。然後(hou)加(jia)入(ru)羊(yang)抗(kang)人IgM-HRP（辣根過氧化(hua)物(wu)酶(mei)）酶結合(he)物(wu)，經(jing)第二(er)次(ci)孵(fu)育後(hou)，酶結合(he)物(wu)就(jiu)會與①次孵(fu)育結合(he)上(shang)的HEV IgM抗(kang)體(ti)相(xiang)結合(he)，洗(xi)板(ban)除(chu)去(qu)未(wei)結合(he)的(de)酶結合(he)物(wu)，加(jia)入(ru)TMB底(di)物(wu)溶液(ye)，在(zai)第三(san)次(ci)孵(fu)育時會發(fa)生(sheng)酶(mei)-底(di)物(wu)反(fan)應，只(zhi)有(you)那些含有(you)HEV IgM抗體和(he)酶結合(he)物(wu)所形成(cheng)的(de)復合(he)物(wu)的(de)孔才會發(fa)生(sheng)顏(yan)色(se)變化(hua)，加(jia)入(ru)硫(liu)酸溶液(ye)終(zhong)止(zhi)酶(mei)和(he)底(di)物(wu)間的反(fan)應，並(bing)在(zai)波(bo)長(chang): 450nm處測量(liang)O.D.值,按(an)照(zhao)本(ben)HEV IgM抗體elisa試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)測(ce)試(shi)標(biao)準(zhun), O.D.值大(da)於或(huo)等於Cut-Off值的(de)樣(yang)品被(bei)認(ren)為(wei)是初試(shi)陽(yang)性。

ELISA的基(ji)礎是抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體的固相化(hua)及(ji)抗(kang)原(yuan)或抗體的酶(mei)標(biao)記(ji)。結合(he)在(zai)固相(xiang)載體(ti)表面(mian)的抗(kang)原或(huo)抗體仍(reng)保(bao)持其(qi)免(mian)疫(yi)學活(huo)性(xing)，酶(mei)標(biao)記(ji)的(de)抗(kang)原或抗體既(ji)保(bao)留(liu)其(qi)免(mian)疫(yi)學活(huo)性(xing)，又保(bao)留(liu)酶(mei)的(de)活(huo)性(xing)。在(zai)測定(ding)時，受檢(jian)標(biao)本(ben)（測(ce)定(ding)其(qi)中(zhong)的(de)抗體或(huo)抗(kang)原）與固相載體(ti)表面(mian)的抗(kang)原或(huo)抗體起反(fan)應。用(yong)洗(xi)滌(di)的方(fang)法(fa)使固相(xiang)載體(ti)上(shang)形(xing)成的抗原(yuan)抗體復合(he)物(wu)與液(ye)體(ti)中(zhong)的(de)其(qi)他(ta)物(wu)質(zhi)分(fen)開(kai)。再加(jia)入(ru)酶(mei)標(biao)記(ji)的(de)抗(kang)原或抗體，也(ye)通(tong)過反(fan)應而(er)結合(he)在(zai)固相(xiang)載體(ti)上(shang)。此時固(gu)相上(shang)的酶量(liang)與標(biao)本(ben)中(zhong)受檢(jian)物(wu)質(zhi)的(de)量(liang)呈壹(yi)定(ding)的(de)比例(li)。加(jia)入(ru)酶(mei)反(fan)應的(de)底(di)物(wu)後(hou)，底(di)物(wu)被(bei)酶(mei)催(cui)化(hua)成(cheng)為(wei)有(you)色產物(wu)，產(chan)物(wu)的(de)量與標(biao)本(ben)中(zhong)受檢(jian)物(wu)質(zhi)的(de)量(liang)直接相關(guan)，故(gu)可(ke)根據呈色的(de)深(shen)淺(qian)進行定性或(huo)定(ding)量(liang)分(fen)析。由(you)於酶(mei)的(de)催(cui)化(hua)效(xiao)率很高(gao)，間接地放大(da)了免(mian)疫反(fan)應的(de)結果(guo)，使測定(ding)方(fang)法(fa)達(da)到很高(gao)的敏感(gan)度。 ELISA可(ke)用於測(ce)定(ding)抗原(yuan)，也可(ke)用於測(ce)定(ding)抗體(ti)。

上壹篇(pian)：微量(liang)離(li)心(xin)管(guan)的使用方(fang)法(fa)及(ji)註(zhu)意事(shi)項(xiang)
下(xia)壹篇(pian)：PCR板(ban)的(de)產(chan)品(pin)用(yong)途介紹

咨(zi)詢(xun)在(zai)線客服