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您可知(zhi)elisa試(shi)劑盒(he)采用了哪些(xie)洗板方(fang)法?
ELISA試劑盒(he)中(zhong)的(de)樣品都(dou)要做復孔或(huo)三(san)孔,然後(hou)計算(suan)每個(ge)濃度(du)規範(fan)品的均(jun)勻(yun)OD值,復孔的變異(yi)系(xi)數應該(gai)小於20%;
制(zhi)造規(gui)範(fan)曲線;
均(jun)勻(yun)OD值減(jian)去(qu)空白(bai)孔的OD值。
以減(jian)去(qu)底(di)後(hou)的OD值為(wei)X軸,規範(fan)品的濃(nong)度(du)為(wei)Y軸,利用作圖(tu)軟件(jian)得(de)出(chu)壹個(ge)適宜的計(ji)算辦(ban)法。主張運用適宜的軟件(jian)來(lai)作(zuo)圖(tu),這(zhe)款(kuan)軟件(jian)能夠給(gei)出(chu)許多種辦法,並從中(zhong)挑選(xuan)壹條(tiao)適宜的方(fang)程,要(yao)想檢(jian)驗某(mou)條(tiao)曲線是否(fou)與表(biao)中(zhong)數據符合(he),能夠將規範(fan)品的濃(nong)度(du)作為(wei)未知(zhi)數,將對應的(de)OD值帶入(ru)該(gai)方(fang)程,計(ji)算(suan)出(chu)規範(fan)品的濃(nong)度(du),得(de)到(dao)的(de)成(cheng)果(guo)應該(gai)與(yu)實際濃度(du)很接近(jin)。
假(jia)如(ru)出(chu)現規(gui)範(fan)曲線的線性欠好(hao),或(huo)平(ping)行性欠好(hao)(雙孔對照孔的OD值差別(bie)很大),或(huo)出(chu)現跳(tiao)孔的現(xian)象(xiang),可(ke)能引起的原(yuan)因(yin)有(you)酶標(biao)板孔間相(xiang)互(hu)汙(wu)染(ran)、洗(xi)板後(hou)未能趕快(kuai)進行下(xia)壹步操作(zuo)、增加(jia)樣品或(huo)其它(ta)試劑時(shi)操(cao)作的(de)辦法不(bu)對、孵育(yu)方位(wei)避(bi)光(guang)性不(bu)佳(jia)或(huo)蓋(gai)板膜沒有(you)密(mi)封好(hao)使得(de)水(shui)分(fen)蒸(zheng)發(fa)、酶標(biao)板孔問參加(jia)的(de)試(shi)劑量(liang)不(bu)同,相(xiang)對應的(de)解(jie)決辦法是加(jia)樣時請(qing)當(dang)心勿(wu)將液體(ti)濺人另壹孔中(zhong),人(ren)工洗(xi)板時(shi)也請(qing)當(dang)心,勿(wu)將洗滌(di)液濺人另壹微孔中(zhong)、在洗(xi)板後(hou)及時(shi)進行下(xia)壹步操作(zuo)、增加(jia)試(shi)劑時(shi)請(qing)懸(xuan)空滴入(ru),切記勿(wu)將槍頭(tou)接觸(chu)到(dao)板孔內(nei),汲(ji)取不(bu)同試(shi)劑瓶(ping)中(zhong)的(de)液體(ti)時(shi)就(jiu)要更(geng)換壹次槍頭(tou)、承認孵(fu)育環(huan)境(jing)不(bu)透(tou)光(guang),蓋(gai)板膜將酶標(biao)板密(mi)封好(hao)、運用已校正(zheng)過的(de)微量(liang)加(jia)樣器。
ELISA試(shi)劑盒(he)可以采用:
手工洗(xi)板方(fang)法:吸(xi)去(qu)或(huo)甩掉(diao)酶標(biao)板內(nei)的(de)液體(ti),在實驗臺(tai)上(shang)鋪墊幾(ji)層吸(xi)水(shui)紙(zhi),酶標(biao)板朝(chao)下(xia)用力拍(pai)幾(ji)次,將推(tui)薦(jian)的洗(xi)滌緩沖(chong)液至少(shao)0.4毫(hao)升註(zhu)入(ru)孔內(nei),浸(jin)泡1-2分(fen)鐘(zhong),根據需(xu)要(yao),重復此(ci)過程數次。
在儲(chu)存(cun)及孵(fu)育過程中(zhong)避(bi)免(mian)將試劑暴(bao)露(lu)在強(qiang)光(guang)中(zhong)。所(suo)有(you)試劑瓶(ping)蓋(gai)須蓋(gai)緊(jin)以防止(zhi)蒸發(fa)和(he)汙(wu)染(ran),試(shi)劑避(bi)免(mian)受(shou)到(dao)微生(sheng)物(wu)的(de)汙(wu)染(ran),因(yin)為(wei)蛋白(bai)水(shui)解(jie)酶的幹(gan)擾(rao)將導致(zhi)出(chu)現錯(cuo)誤的結果(guo)。
自(zi)動洗板:如(ru)果(guo)有(you)自(zi)動洗板機,應在熟練使用後再用到正(zheng)式(shi)實驗過程中(zhong)。
濃(nong)洗(xi)滌(di)液會有(you)鹽(yan)析出(chu),稀釋(shi)時可(ke)在水(shui)浴(yu)中(zhong)加(jia)溫(wen)助(zhu)溶。
剛(gang)開(kai)啟(qi)的(de)酶標(biao)板孔中(zhong)可(ke)能會有(you)少(shao)許水樣物(wu)質,此(ci)為(wei)正(zheng)常現(xian)象(xiang),不(bu)會對實驗結果(guo)造成(cheng)任(ren)何影響。
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