本(ben)生生物帶您了(le)解ELISA試劑(ji)盒實驗重要的(de)步驟

　　elisa試(shi)劑(ji)盒是(shi)壹(yi)種(zhong)敏(min)感性(xing)高，特(te)異性(xing)強(qiang)，重(zhong)復性(xing)好的(de)實驗診斷(duan)方法(fa)。雖然(ran)elisa試(shi)劑盒的(de)操(cao)作(zuo)步驟看(kan)似簡(jian)單(dan)，但(dan)沒(mei)做(zuo)到位(wei)的(de)話(hua)就會影響實驗的(de)效(xiao)果。所(suo)以elisa試劑盒實驗時(shi)至(zhi)關重(zhong)要的(de)步驟有：

　　壹(yi)、重要的(de)洗滌(di)

　　不(bu)充分的(de)洗滌(di)會導致差(cha)異和高(gao)背(bei)景(jing)，從(cong)而(er)帶來(lai)不(bu)理想(xiang)的(de)實驗結果。如(ru)果未(wei)結(jie)合的(de)材料殘(can)留在微(wei)孔(kong)板(ban)中，那麽(me)它會增(zeng)加背景(jing)噪音。有必要的(de)話(hua)，可(ke)增(zeng)加洗滌(di)液中的(de)鹽(yan)濃度，這會阻止非特(te)異結(jie)合反應。如(ru)果背(bei)景(jing)過高(gao)，懷疑洗滌(di)不(bu)夠(gou)時(shi)，可(ke)以嘗試增(zeng)加洗滌(di)次數(shu)。

　　二(er)、關鍵的(de)封(feng)閉

　　封(feng)閉液的(de)作(zuo)用是讓不(bu)相關的(de)蛋(dan)白(bai)占(zhan)據微(wei)孔(kong)板(ban)中潛(qian)在的(de)結(jie)合位(wei)點。這就降低了(le)可產生信(xin)號(hao)的(de)抗(kang)體非特異(yi)結(jie)合的(de)機(ji)會。如(ru)果背(bei)景(jing)過高(gao)，懷疑封(feng)閉不(bu)充分，那麽(me)可(ke)以嘗試使(shi)用更高濃度的(de)封(feng)閉液，或(huo)適當延(yan)長封(feng)閉時(shi)間(jian)。

　　目(mu)前主(zhu)要有兩種(zhong)類(lei)型(xing)的(de)封(feng)閉液：蛋(dan)白(bai)和非(fei)離(li)子(zi)型(xing)去(qu)汙(wu)劑(ji)。使(shi)用的(de)類(lei)型(xing)須(xu)取(qu)決(jue)於多個(ge)因素(su)，包括微(wei)孔(kong)板(ban)的(de)表(biao)面試劑(ji)、吸(xi)附的(de)抗(kang)原、抗體和檢測試劑。好的(de)封(feng)閉液應降(jiang)低非特異性(xing)結合，但它不(bu)應當(dang)與(yu)抗(kang)原(yuan)、抗體或(huo)檢測試劑發生相(xiang)互作(zuo)用。

　　三(san)、抗(kang)體濃度須優(you)化(hua)

　　如(ru)果試(shi)劑(ji)稍有不(bu)同(tong)，則可能需要優(you)化(hua)抗體的(de)量。非特(te)異(yi)的(de)抗(kang)體結合會增(zeng)加背景(jing)。為了(le)防(fang)止(zhi)這壹(yi)點，切勿使(shi)用過(guo)多的(de)壹(yi)抗或(huo)二(er)抗(kang)。

　　四、檢測試劑要適量

　　切勿使(shi)用過(guo)多的(de)檢測試劑。如(ru)果濃度過高(gao)，或(huo)者(zhe)未(wei)正(zheng)確稀釋(shi)，則會導致高(gao)背景(jing)。也不(bu)要顯(xian)色(se)過(guo)度，如(ru)有必要，優(you)化(hua)壹(yi)下(xia)何時(shi)應加入終(zhong)d止液。

　　只有確保(bao)每壹(yi)步操(cao)作(zuo)都做(zuo)到位(wei)，才(cai)會呈現(xian)完美(mei)的(de)實驗結果。所(suo)以elisa實驗的(de)每壹(yi)步都(dou)很(hen)重要，不(bu)可以掉以輕(qing)心。