天(tian)津(jin)本(ben)生生物(wu)在這提(ti)醒大家做細胞培養時(shi),要(yao)註意血(xue)清的分裝：以(yi)下(xia)就是相關問(wen)題詳解，不(bu)妨(fang)來看(kan)看。

　　血(xue)清是細胞培養中(zhong)重要(yao)的元素之(zhi)壹。在實驗(yan)室(shi)操作中(zhong)要(yao)註意的事(shi)項(xiang)及處(chu)理方法(fa)如下(xia)：

　　1. 血(xue)清保存 : 建議血(xue)清應保存在-5至(zhi)-2O。然而(er)，若存放(fang)於4時，請(qing)勿(wu)超(chao)過(guo)壹個(ge)月(yue)。若您壹次(ci)無(wu)法(fa)用(yong)完(wan)壹瓶，建議您無(wu)菌(jun)分裝血(xue)清至(zhi)恰(qia)當的滅(mie)菌(jun)容(rong)器(qi)內(nei)，再(zai)放(fang)回冷(leng)凍。

　　2. 解凍血(xue)清的方法(fa) : 建議您將(jiang)血(xue)清從(cong)冷(leng)凍箱取出(chu)後(hou)，先置於(yu)2～8冰(bing)箱(xiang)使之(zhi)融解，然(ran)後(hou)在室溫(wen)下(xia)使之(zhi)全(quan)融。但必須(xu)註意的是，融解過(guo)程中(zhong)必須(xu)規則(ze)地(di)搖(yao)晃均勻。

　　3. 血(xue)清解凍後(hou)發(fa)現有(you)絮(xu)狀沈澱(dian)物出(chu)現，該如何(he)處理?

　　血(xue)清中(zhong)沈澱(dian)物的出(chu)現有(you)許(xu)多(duo)種(zhong)原(yuan)因，但原(yuan)因是由於(yu)血(xue)清中(zhong)脂蛋白的變(bian)性(xing)所造成，而(er)血(xue)纖(xian)維(wei)蛋白(形成(cheng)凝(ning)血(xue)的蛋白之(zhi)壹)在血(xue)清解凍後(hou)，也(ye)會存在於血(xue)清中(zhong)，亦(yi)是造成沈澱物(wu)的主要(yao)原(yuan)因之(zhi)壹。但這些絮(xu)狀沈澱(dian)物，並(bing)不影(ying)響血(xue)清本(ben)身(shen)的質量。

　　若您欲去除這(zhe)些絮(xu)狀沈澱(dian)物，可(ke)以(yi)將(jiang)血(xue)清分裝至(zhi)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)內(nei)，以(yi)400g稍(shao)微離(li)心(xin),上清(qing)液(ye)即(ji)可(ke)接著加入培養基(ji)內(nei)壹起過(guo)濾(lv)。我(wo)們(men)不(bu)建議您以(yi)過(guo)濾(lv)的方法(fa)去除這(zhe)些絮(xu)狀沈澱(dian)物，因(yin)為(wei)它可(ke)能(neng)會阻塞(sai)您的過(guo)濾(lv)膜(mo)。

　　4. 為(wei)什(shen)麽(me)要(yao)熱(re)滅活(huo)血(xue)清?

　　加熱(re)可以(yi)滅(mie)活補(bu)體系(xi)統(tong)。激(ji)活(huo)的補(bu)體參與(yu)溶(rong)解細胞事件，刺(ci)激(ji)平(ping)滑肌(ji)收(shou)縮，細胞和血(xue)小板(ban)釋放(fang)組胺(an)，激(ji)活(huo)淋巴(ba)細胞和巨(ju)噬(shi)細胞。在免疫學(xue)研究，培養ES細胞，昆蟲細胞和平滑(hua)肌(ji)細胞時，推(tui)薦使(shi)用(yong)熱(re)滅活(huo)血(xue)清。

　　5. 有(you)必要(yao)做熱(re)滅活(huo)嗎?

　　實驗顯(xian)示，經過(guo)正確處(chu)理的熱(re)滅活(huo)血(xue)清，對大(da)多(duo)數的細胞而(er)言是不需(xu)要(yao)的。經此(ci)處理過(guo)的血(xue)清對細胞的生長(chang)只有(you)微(wei)小(xiao)的促(cu)進，或(huo)*沒有(you)任(ren)何(he)作用(yong)，甚(shen)至(zhi)通(tong)常因(yin)為(wei)高(gao)溫處(chu)理影(ying)響了(le)血(xue)清的質量，而(er)造成細胞生長(chang)速率(lv)的降(jiang)低(di)。而(er)經過(guo)熱(re)處理的血(xue)清，沈澱(dian)物(wu)的形成(cheng)會顯(xian)著的增多(duo)，這(zhe)些沈(chen)澱物在倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，像是“小黑點”，常常會讓(rang)研究者誤以(yi)為(wei)是血(xue)清遭受(shou)汙(wu)染，而(er)把血(xue)清放(fang)在37環(huan)境(jing)中(zhong)，又會使(shi)此(ci)沈澱(dian)物更(geng)增多(duo)，使(shi)研究者誤認為(wei)是微生物(wu)的分裂(lie)擴增。

　　因(yin)此(ci)我們(men)建議您，若非(fei)必須(xu)，您可以(yi)不(bu)需(xu)要(yao)做熱(re)處理這壹步。這樣壹來，不但節省時(shi)間，更(geng)確保血(xue)清的質量!

　　6. 為(wei)什(shen)麽(me)儲(chu)存在冰箱(xiang)中(zhong)的胎(tai)牛(niu)血(xue)清會出(chu)現沈(chen)澱?

　　胎(tai)牛血(xue)清沒有(you)預(yu)老化(hua)，儲(chu)存在2-8時，血(xue)清中(zhong)的各(ge)種(zhong)蛋白和(he)脂蛋白(如(ru)冷(leng)凝(ning)集(ji)素、纖(xian)維(wei)蛋白原(yuan)、玻(bo)粘(zhan)連蛋白等)可(ke)能(neng)聚集(ji)而(er)形成(cheng)沈澱(dian)或(huo)可見的混(hun)濁(zhuo)。這(zhe)應該不會影(ying)響血(xue)清的質量。推(tui)薦在-20儲(chu)存胎(tai)牛(niu)血(xue)清，避免(mian)反復凍融。

　　7. 如何(he)避免(mian)沈(chen)澱(dian)物(wu)的產生?

　　解(jie)凍血(xue)清時，請(qing)按照所建議的逐(zhu)步解凍法(-20至(zhi)4至(zhi)室溫)，若血(xue)清解凍時改(gai)變(bian)的溫(wen)度(du)太(tai)大(da)(如(ru)-20至(zhi)37)，實驗顯(xian)示非(fei)常容(rong)易(yi)產生沈(chen)澱(dian)物。

　　解(jie)凍血(xue)清時，請(qing)隨(sui)時(shi)將(jiang)之(zhi)搖(yao)晃均勻，使溫度(du)及成(cheng)分均壹，減少沈澱的發(fa)生。

　　請(qing)勿(wu)將(jiang)血(xue)清置於(yu)37太(tai)久。若在37放(fang)置太(tai)久，血(xue)清會變(bian)得混(hun)濁(zhuo)，同(tong)時血(xue)清中(zhong)許(xu)多(duo)較(jiao)不(bu)穩定(ding)的成(cheng)分也(ye)會因(yin)此(ci)受到(dao)損害(hai)，而(er)影(ying)響血(xue)清的質量。

　　血(xue)清的熱(re)滅活(huo)非(fei)常容(rong)易(yi)造成沈澱物(wu)的增多(duo)，若非(fei)必要(yao)，可(ke)以(yi)無(wu)須(xu)做此(ci)步驟。

　　若必須(xu)做血(xue)清的熱(re)滅活(huo)，請(qing)遵(zun)守(shou)56，30分鐘(zhong)的原(yuan)則，並(bing)且隨時(shi)搖(yao)晃均勻。溫度(du)過(guo)高(gao)，時(shi)間(jian)過(guo)久或(huo)搖晃不(bu)均勻，都會造成沈澱物(wu)的增多(duo)。

　　註：以(yi)上資(zi)料僅供(gong)參考(kao)!